چکیده
این پروژه با هدف مطالعه باکتريهای اسید لاکتیک روده، جداسازی و شناسایی سویههای انتروکوکی، کاربرد آن در تغذیه و تأثیر آن بر میزان رشد، شاخصهاي ایمنی و خونی بچه تاسماهیان ایرانی در مؤسسه تحقیقات بینالمللی تاسماهیان دریای خزر طی سالهای 1393- 1389 انجام گرفت. در مجموع 180 بچه تاسماهی ایرانی نمونهبرداری شد و باکتریهای اسید لاکتیک روی محیط کشت آگارMRS جداسازی و شمارش شدند. باکتریهای اسیدلاکتیک از بچهتاسماهیان ایرانی پس از 60 روز تغذیه دستی در مخازن فایبرگلاس با تراکم لگاریتمی 61/5 – 93/2 (CFU g-1) و با میانگین لگاریتمی 58/0 ± 38/4 (CFU g-1) مورد شمارش قرار گرفتند. نتایج توالی یابی ژن 16S rRNA در باکتریها نشان داد که باکتریهای اسید لاکتیک Lactococcus garvieae و lactis Lactococcus بهترتیب دارای بیشترین فراوانی 55/42 % و 17/36 % بودهاند. همچنین در این مطالعه باکتریهای Pediococcus pentosaceus (90/14 %)، Weissella cibaria (25/4 %) و Enterococcus faecalis (13/2 %) مورد شناسایی قرار گرفتند. اثر E.faecalis پس از افزودن به غذا در یک دوره 60 روزه نیز در شرایط پرورشی بررسی شد. مطالعات آزمایشگاهی نشان داد که این باکتریها در محدوده دمایی 30-20 درجه سانتیگراد و شوری 8-4 % قابلیت رشد دارند. نتایج نشان داد که باکتریهای W.cibaria و E.faecalisتوانایی رشد در pH بین 9-7/3 را دارند. همچنین باکتریهای L.lactis و L.garvieae بهترتیب در محدوده pH 5 تا 9 و 6 تا 9 توانایی رشد دارند و باکتری P. pentosaceus قادر به رشد درpH بالاتر از 7 نبود. ارزیابی فعالیت ترکیبات ترشحی خارج سلولی این باکتریها نشان داد که این باکتریها در دامنه دمایی 30-25 درجه سانتیگراد از توانایی مقابله با A. hydrophila برخوردارند. بیشترین فعالیت آنتاگونیستی ترکیبات خارج سلولی باکتریهای cibaria W.، P. pentosaceus و L. lactis علیه A. hydrophila در9pH= بود. باکتریهای W. cibaria و faecalis E.نسبت به آنتیبیوتیکهای Oxytetracycline، Erythromycin، Trimethoprim sulfamethoxazol، Enrofloxacin، Florfenicol و Flumequine مقاوم بودند. باکتری P. pentosaceus نسبت به Oxytetracycline، باکتری L. lactis نسبت به Oxytetracycline، Erythromycin، Enrofloxacin، Florfenicol و باکتری L. garvieae نسبت به همه آنتی بیوتیکهای مورد استفاده بجز Erythromycin حساسیت نشان داد. استفاده از E.faecalis در تغذیه تاسماهیان بهمدت 60 روز بهبود معنیداری در افزایش وزن، ضریب رشد ویژه، فعالیت لیزوزیم، IgM، هموگلوبین، گلبولهای سفید و قرمز، هموگلوبین ذرهای، و نوتروفیل و کاهش ضریب تبدیل غذایی نشان داد (<0/05 P). بطور کلی نتایج این پژوهش نشان داد که مصرف E.faecalis غلظت108 باکتری در گرم غذا میتواند در بهبود رشد، کارآیی غذا، نرخ رشد ویژه ایمنی و بهداشت بچه تاسماهی ایرانی بهعنوان یک پروبیوتیک پیشنهادی مؤثر باشد.